总蛋白试剂试盒说明书
                                   双缩脲法
一、测定原理:
蛋白质多肽链中的肽键(-CONH)在碱性条件下,与铜离子络合形成紫红色化合物,在540nm处有最大吸收,所产生的络合物颜色与蛋白质的浓度成正比。通过与同样处理的蛋白标准品相比较,可求出血清总蛋白的浓度。
 
二、试剂组成与配制:
1.测定试剂50mlX4瓶, 4℃避光保存。
主要成分:硫酸铜6.0mmol/L,氢氧化钠600mmol/L,碘化钾30mmol/L,酒石酸钾钠32mmol/L。
2. 校准液(68g/L)规格:1ml ,4℃避光保存。
 
三、样本要求
一、血清或血浆样本均应不溶血,在2-8℃下可保存8天。
二、操作步骤:
1、试剂配制:本试剂为液体,可直接使用
2.实验条件:
温度      37℃       试剂用量    1000ul
       波长      540nm       样本用量    20ul
     反应时间    600秒       测定模式    终点法
注意:本试剂具有腐蚀性,请勿用口吸吸管。如果溅出,应立即用大量流水冲洗被污染部位。
3.校准及质量控制程序:
手工操作:按下表加入试剂、校准品及样本.
  空白管 校准管 质控管 样本管
TP试剂 (ul) 1000 1000 1000 1000
37℃孵育10分钟        
蒸馏水  (ul) 20      
校准品  (ul)   20    
质控品  (ul)     20  
样本    (ul)       20
混匀,37℃下孵育10分钟,波长540nm,空白管调零,读取校准管及样品管的吸光度(A)值
 
4.实验结果的计算方法:

参考值:65-80g/L
   引用的参考值范围代表本法的期望值,仅供参考,建议各实验室验证这一参考范围或建立自己的参考值范围
 
四、注意事项:
1、血红蛋白≤2g/L、胆红素≤342umol/L和维生素C≤0.4g/L、甘油三酯≤5.0mmol/L均不影响效果。
2、当检验结果≥150g/L时,请用生理盐水稀释后在测定,结果乘以稀释倍数。
3、试剂中含有防腐剂和稳定剂,可能存在一定的刺激作用和毒性,请勿直接接触皮肤、眼睛。一旦接触,立即用大量清水冲洗。请勿吞服。
4、试剂与样本的用量可按比例进行改变。